部分唾液乳杆菌(Ligilactobacillus salivarius)菌株具备优良的益生特性和较好的应用潜力。以唾液乳杆菌ATCC 11741菌株为研究对象,探究其生长特性、耐受性以及黏附能力,以期为唾液乳杆菌的有效利用提供理论基础。
【方法】利用形态观察和16S rRNA基因测序确认唾液乳杆菌ATCC 11741的准确性;通过监测生长曲线和产酸曲线来探究其生长特性;此外,还进行了一系列耐受性实验,包括耐酸、耐碱、耐胆盐、耐高渗和耐温测试,以评估其耐受能力;最后,借助自聚集和疏水性实验来间接测定其黏附性。
【结果】唾液乳杆菌ATCC 11741呈快速"S"型生长;产酸高峰期在2-7 h,14 h后趋于稳定,最终pH值稳定在4.3;该菌株在pH 4.0-11.0范围内生长良好,在pH 2.0的MRS培养基中培养4 h存活率为50.48%;在胆盐浓度为0.1%的MRS培养基中培养2 h之后的存活率可达到94.44%;在NaCl浓度为6%的MRS培养基中仍能生长;温度对其生长影响显著,30-42 ℃促进生长,而20 ℃和50 ℃则抑制其生长;转速为120 r/min和180 r/min对其生长无显著影响;该菌株在5 h时自聚集率为41.4%,疏水性(碳烃化合物粘着法)为44.5%。
【结论】L. salivarius ATCC 11741是一株生长快,耐酸、耐碱、耐盐能力强,具有一定胆盐耐受性,温度适应性较广,具有较强黏附能力的乳酸菌。
采用传统微生物学方法,对该菌株的生物学特性和益生性能进行深入分析后,通过纳米孔测序技术完成了对其全基因组测序和比较基因组分析。
结果:分离得到5株唾液乳杆菌(T1~T5),与OR430873.1的同源性高达99.86%~100%;T1~T5菌株均有良好的耐酸和耐胆盐能力,T4株对大肠杆菌和沙门菌有良好的抑制效果;T4株的基因组序列总长度为1 918 675 bp, GC含量为33.01%;唾液乳杆菌基因组中预测到1 861个编码基因,22个rRNA操纵子和79个tRNA;通过基因本体论(GO)、直系同源簇(COG)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对编码基因进行对比分析,发现参与细胞翻译、核糖体结构、生物合成、新陈代谢和细胞过程的基因数较多。
结论:获得了有良好耐酸和耐胆盐能力的唾液乳杆菌,具有良好的抗菌效果,有望进一步开发为益生菌产品。